大鼠胰岛素原基因转染肠道上皮细胞构建类胰岛B细胞系的研究
Construction of Pseudo-B Cell Line by Transfecting Rat Proinsulin Gene to Mouse Intestinal Epithelial Cell
摘要目的 观察重组大鼠胰岛素原基因转染小鼠肠道上皮细胞(IEC-6)后,IEC-6的胰岛素表达情况.方法 将IEC-6分为重组大鼠胰岛素原基因pCMV/proinsulin转染组(A组)、空载质粒pCMV转染组(B组)和未转染组(C组).利用脂质体法将pCMV/proinsulin和pCMV分别转染IEC-6,用RT-PCR法检测转染后IEC-6胰岛素原基因mRNA的表达,并用超敏放免法测定转染后IEC-6的胰岛素表达水平.结果 pCMV/proinsulin转染IEC-6后,IEC-6能表达胰岛素原基因mRNA.3组IEC-6表达的胰岛素水平间差别有统计学意义(P<0.05).A组IEC-6胰岛素表达水平与B组、C组比较,差别有统计学意义(P<0.001);B组IEC-6胰岛素表达水平与C组比较,差别无统计学意义(P>0.05).结论 重组大鼠胰岛素原基因能成功转染小鼠肠道细胞并分泌胰岛素,为开展糖尿病基因治疗的研究奠定了实验基础.
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