香烟提取物对大鼠骨骼肌细胞肌肉生长抑制素表达的影响研究

Influence of Cigarettes Smoke Extract on the Expression of MSTN in SD Rat Skeletal Muscle Cells

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摘要目的：探讨香烟提取物（CSE）对骨骼肌细胞肌肉生长抑制素（MSTN）表达的影响。方法取新生3~5 d 的 SD 大鼠的骨骼肌组织，用含150 ml/ L 胎牛血清的高糖 DMEM 培养基在37℃、5% CO2培养箱内进行体外原代细胞培养和传代。采用免疫荧光鉴定检测骨骼肌细胞。选择恰当的 CSE 浓度（2.5%、5.0%、10.0%）刺激48 h，分为2.5%组、5.0%组、10.0%组和对照组（不予 CSE 刺激），分别采用实时定量 PCR 检测 MSTN mRNA 的表达水平与Western blotting 检测 MSTN 蛋白的表达水平。结果骨骼肌细胞培养成活率高，体外生长、增殖良好。实时定量 PCR检测结果显示，4组 MSTN mRNA 相对表达水平比较，差异有统计学意义（ P ＜0.05）；其中，5.0%组、10.0%组MSTN mRNA 相对表达水平高于对照组和2.5%组（P ＜0.05）。Western blotting 检测结果显示，4组 MSTN 蛋白表达水平比较，差异有统计学意义（P ＜0.05）；其中，5.0%组、10.0%组 MSTN 蛋白表达水平高于对照组和2.5%组（P ＜0.05）。结论骨骼肌细胞模型可对 CSE 刺激产生有效反应，为吸烟引起骨骼肌抑制的机制研究奠定了细胞学基础。