A型流感病毒核蛋白全套单链抗体库的构建
Construction of single chain antibody library against nucleoprotein of influenza virus A
摘要目的构建A型流感病毒核蛋白全套单链抗体库.方法利用全套噬菌体抗体表面展示技术,从A型流感病毒核蛋白免疫的BALB/c小鼠脾淋巴细胞中提取总RNA,利用抗体可变区PCR混合引物进行全套抗体重、轻链基因的扩增.经重叠延伸反应,在体外随机装配成单链抗体.将其克隆到噬菌粒载体PCANTAB5E中,电转化TG1细菌,以辅助噬菌体M13K07超感染噬菌体文库,构建全套ScFv抗体库.结果成功利用噬菌体表面展示技术,构建了A型流感病毒核蛋白全套单链抗体库,库容量达到8.2×107.结论构建全套A型流感病毒核蛋白全套单链抗体库,为利用亲和富集筛选技术,获得具有A型流感病毒核蛋白结合活性的完整重组噬菌体克隆奠定了基础.
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