换一批
换一批具有靶向作用的人类胰岛素原表达载体的构建与鉴定
Construction and idenfication of target-oriented plasmid vector expressing human insulin
摘要目的 构建能够靶向作用于大鼠胰岛细胞的绿色荧光蛋白及人类胰岛素原表达载体,为糖尿病的特异性基因治疗奠定基础.方法 采用PCR法从SD大鼠全血基因组中扩增大鼠胰岛素Ⅰ启动子(RIP)片段,将其克隆至pIRES2-EGFP质粒载体的启动子位点,用重叠延伸PCR法从人类全血基因组DNA扩增获得人类胰岛素原基因片段,插入pIRES2-EGFP质粒载体的多克隆位点,构建大鼠胰岛素Ⅰ启动子驱动的人类胰岛素原及绿色荧光蛋白表达载体.结果 构建的RIP-人类胰岛素原及绿色荧光蛋白表达载体经酶切及测序结果均正确. 结论构建了受大鼠胰岛素Ⅰ启动子驱动的人类胰岛素原及EGFP表达载体,为开展糖尿病的特异性基因治疗奠定了基础.
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