莱菔硫烷对鼻咽癌RASSF1A基因甲基化及表达的影响
Effect of sulforaphane on RASSF1A methylation and gene expression in nasopharyageal carcinoma cells
摘要目的 探讨莱菔硫烷(SFN)对鼻咽癌CNE-2细胞RASSF1A甲基化及蛋白表达水平的影响.方法体外培养鼻咽癌CNE-2细胞,用0,5、10、30μM的SFN与其孵育24~96h,用MTT法检测细胞的增值情况;流式细胞术分析细胞周期的改变;采用甲基化特异性PCR检测RASSF1A基因启动子区域的甲基化改变情况;提取SFN处理后细胞的RNA,用逆转录PCR检测RASSF1A的表达水平,并用Western blot检测处理前后RASSF1A蛋白的表达.结果 SFN能以时间和剂量依赖性方式抑制CNE-2细胞增值,并能使细胞周期阻滞于S期和G2/M期.随着SNF浓度的增加,甲基化RASSF1A水平逐渐减弱,非甲基化RASSF1A水平逐渐增多.同时SFN能明显上调RASSF1A的mRNA和蛋白表达水平.结论 SFN能使RASSF1A基因去甲基化,并上调非甲基化基因的表达水平,从而抑制细胞的增值和分化而具有抗肿瘤的效应.
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