摘要目的 探讨神经胶质细胞经过脂多糖(Lipopolyssacride,LPS)预激后,其培养上清对神经元功能的影响.方法 体外培养神经元与神经胶质细胞,免疫荧光法进行纯度鉴定.神经胶质细胞分为4组:未刺激对照组、0.01 μg/ml LPS单次刺激组、1μg/ml LPS单次刺激组、预刺激组(先采用0.011μg/ml LPS刺激18h后,再用1μg/mlLPS刺激24h).经过相应处理后收获各组条件培养上清,分别加入到神经元中,与神经元共同孵育24h后收集细胞与培养上清.采用CCK-8试剂盒与ELISA法检测神经元的存活率和分泌TNF-α、IL-6水平.结果 星形胶质细胞预刺激组条件培养上清作用于神经元后,细胞存活率下降,与0.01μg/ml、1μg/ml LPS单次刺激组比差异均具有统计学意义(P<0.05);小胶质细胞各组条件培养上清作用于神经元后,细胞存活率变化不明显(P均>0.05);在星形胶质细胞各刺激组上清作用下,神经元产生TNF-α的水平,各LPS处理组培养上清刺激下水平升高,其中1μg/ml LPS单次刺激组升高明显,与对照组和0.01μg/ml LPS单次刺激组比差异具有统计学意义(P均<0.05);产生IL-6的水平亦升高,与对照组比亦均具有统计学差异(P<0.05或P<0.01);并且,预刺激组较1μg/mlLPS单次刺激组上清作用后,产生IL-6水平较低(P<0.05).各组小胶质细胞条件培养上清作用于神经元后,产生TNF-α的水平,预刺激组水平升高明显,与对照组比差异具有统计学意义(P<0.01);对于IL-6水平,变化趋势同TNF-α,但各组间差异无统计学意义(P>0.0.5).结论 LPS预激参与重新调配了神经胶质细胞分泌活性介质的作用,培养上清中这些分子相互制约或是协同,对神经元产生有可能是保护或是损伤效应.
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