换一批携带hIL-12基因的长双歧杆菌的构建及对血管生成的影响
Construction of Bifidobacterium longum as a delivery system of hlL-12 and effect on angiogenesis of chick embryo chorioallantoic membrane
摘要目的 构建携带人白细胞介素12(hIL-12)基因的长双歧杆菌(Bifidobacterium longum,B.longum),观察其表达产物对鸡胚尿囊膜(Chick embryo chorioallantoic membrane,CAM)血管生成的影响.方法 以前期构建的表达载体pBBADs为基础,将hIL-12基因克隆入载体中,构建质粒pBBADs-hIL-12,电转化长双歧杆菌NCC2705,L-阿拉伯糖诱导表达后,ELISA法鉴定基因表达.原位摄影后分析照片,田氏法计数血管条数,运用IPP软件计算所选区域血管面积.各组数值经检验服从正态分布,采用单因素方差分析(Bonferroni法)检验.结果 成功构建携带hIL-12基因的长双歧杆菌(BL-hIL-12),经过诱导后检测到目的蛋白的表达,诱导24h hIL-12表达水平最高(P＜0.05),为最佳诱导时间.BL-hIL-12诱导组与其它组比较,血管数量及面积均减少,差异有统计学意义(P＜0.05).BL-hIL-12未诱导组、普通双歧杆菌组、生理盐水组两两比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 携带hIL-12的转基因双歧杆菌其诱导表达产物对鸡胚尿囊膜新生血管数目有一定抑制作用.
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