夫西地酸钠抗肠道病毒EV-A71的活性分析

Antiviral activity of sodium fusidate against enterovirus A71

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摘要目的分析夫西地酸钠在细胞水平上的抗肠道病毒活性并分析其抗EV-A71的作用机制.方法通过空斑分析测定夫西地酸钠在RD细胞中抗EV-A71和CV-A16的量-效曲线;通过加入时间分析(time of addition)、病毒吸附及内吞实验、反转录-定量PCR(RT-qPCR)测定病毒RNA水平在复制周期中的变化、携带GFP的病毒RNA(EV-A71-GFP RNA)转染合并荧光观察以及双报告基因分析初步确定夫西地酸钠阻断EV-A71复制的作用机制.结果夫西地酸钠可以显著抑制EV-A71和CV-A16在RD细胞中的复制,MOI为0.001时IC50分别为3.56 μmol/L和5.41 μmol/L.夫西地酸钠抑制EV-A71复制主要发生在复制早期阶段,降低了病毒RNA的丰度和病毒蛋白的合成水平,但不影响病毒的吸附和内吞;与未经药物处理的对照组相比,EV-A71感染5h和8h时,夫西地酸钠导致EV-A71 RNA相对丰度降低了大约70％;EV-A71-GFP RNA在292A细胞中的翻译明显受到夫西地酸钠的抑制,GFP阳性细胞明显减少;夫西地酸钠对EV-A71 5'-UTR所驱动的报告基因翻译抑制程度为30％.结论夫西地钠酸具有抗肠道病毒活性,主要通过直接或间接抑制病毒基因组RNA复制以及干扰病毒蛋白合成或加工而发挥抗EV-A71活性.

作者刘健 ^[1] 曾施暖 ^[1] 孟小斌 ^[2] 江鑫莹 ^[3] 郭学敏 ^[4] 学术成果认领

作者单位中山大学中山医学院人类病毒学研究所,广东广州510080;热带病防治研究教育部重点实验室,广东广州510080 ^[1] 梅州市人民医院,广东梅州,514031 ^[2] 热带病防治研究教育部重点实验室,广东广州,510080 ^[3] 中山大学中山医学院人类病毒学研究所,广东广州510080;热带病防治研究教育部重点实验室,广东广州510080;梅州市人民医院,广东梅州514031 ^[4]

关键词手足口病肠道病毒EV-A71 夫西地酸钠抗病毒活性

主题词病毒(Viruses)肠(Intestines)复制技术(Copying Processes)细胞(Cells)手足口病(Hand, Foot and Mouth Disease)

分类号 R512.5

栏目名称论著

DOI 10.13604/j.cnki.46-1064/r.2019.06.05

发布时间 2019-07-05

基金项目

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