摘要目的 为缩短金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)检测时间,本研究建立一种基于重组酶介导扩增(recombinase aided amplification,RAA)联合双重核酸侧流层析试纸条法(lateral flow strips,LFS)快速检测SA耐热核酸酶nuc基因和mecA耐药基因.方法 在SA基因组中nuc基因和mecA基因的保守序列上设计并筛选高效的RAA引物和探针,验证RAA-LFS同时检测nuc基因和mecA基因的反应温度和时间,进行灵敏度、特异度以及与荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)比较,采用2家三甲医院的52瓶非重复阳性血培养进行前瞻性评价.结果 RAA-LFS在20～45℃下反应15～30 min可同时扩增nuc和mecA基因,检测下限可达102 CFU/mL,50株临床分离的非SA菌株验证nuc和mecA基因的特异度为100％;本实验室保存的30株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)和30株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(methicillin-sensi-tive Staphylococcus aureus,MSSA)nuc基因均阳性,mecA基因共有30株阳性,与qPCR的检测阳性符合率和阴性符合率均为100％,一致性检验Kappa值为1;在52瓶阳性血培养前瞻性分析中,16株MSSA和6株MRSA与梅里埃VITEK-2 compact微生物检测系统的鉴定和药敏试验检测结果符合率100％.结论 本研究将核酸释放剂、RAA、核酸侧流层析试纸条法3项技术组合建立了一种可应用于菌落或阳性血培养瓶检测SA及mecA耐药基因,操作简便、快速、敏感性高的检测方法.