摘要目的 隐匿性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)突变株具有较强传播能力和危害性,探究HBsAg抗原变异、合成及分泌,将为解决临床隐匿性乙型肝炎诊疗问题提供有益的指导.方法 对隐匿性HBV感染(occult hepati-tis B virus infection,OBI)患者HBV基因序列成功克隆乙肝表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)单基因突变体和多基因突变体,使用AlphaFold2.3软件对野生型基突变体结构模型进行蛋白相似性及稳定性分析,并将野生型、单及多位点突变体转染至Huh7细胞,分析不同突变体的细胞内外合成和分泌情况.结果 单突变位点Y100L、Y100C及C139R与野生型相比的均方根偏差(root mean square deviation,RMSD)值较小,G145R与野生型比较的RMSD值较大.Y100L热能差(ΔΔG)最小,其次是Y100C、C139R及G145R.3种多位点突变体与野生型相比的RMSD值均小于1,T63I/Y100L/Q101K热能差(ΔΔG)最小,T125A/F158L/V224G及S113T/F220C次之.Y100C、C139R、G145R合成、分泌以及分泌效率较野生型差异均有统计学意义(P<0.05).S113T/F220C细胞内外的合成、分泌及分泌效率与野生型相比,差异均有统计学意义(P<0.05);T63I/Y100L/Q101K细胞内合成及分泌效率与野生型相比,差异有统计学意义(P<0.05).结论 内质网腔区部分单点突变体在肝细胞内合成和分泌HBsAg降低;内质网腔区和其他结构区域组合的部分多点突变体在肝细胞内合成HBsAg增加及分泌效率降低.