摘要目的 探索老年护理医院环境耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分离株(carbapenem resistant Klebsiella pneumoni-ae,CRKP)的毒力因子、耐药基因和克隆群特征研究,为院感防控和监测策略提供科学依据.方法 采集2024年上海市虹口区某老年护理医院环境样本,通过微量肉汤稀释法测定MIC,分析菌株耐药表型;通过全基因组测序(whole-ge-nome sequencing,WGS)分析CRKP的耐药基因、毒力因子和克隆群特征;利用Proksee绘制细菌全基因组框架图.结果 老年护理医院环境CRKP阳性率为2.30%(6/261),主要分布于高频接触区域(枕头被褥、床扶手和床边柜).药敏试验结果显示,老年护理医院环境CRKP对多黏菌素E和多黏菌素B耐药率为33.33%(2/6),对头孢他啶/阿维巴坦耐药率为16.67%(1/6),共5种耐药谱型.WGS分析发现老年护理医院环境中的CRKP ST11和ST15克隆群高度聚集,患者来源CRKP ST型呈现多样性;老年护理医院环境中的CRKP菌株以携带blaKPC-2及其变体基因为主要特征,但临床环境及患者来源CRKP均同时携带blaKPC-2以及blaNDM;通过对老年护理医院环境来源CRKP菌株HLYKP45(5 743 785 bp,携带blaKPC-35)、患者来源CRKP菌株HZKP2(5 782 393 bp,携带blaKPC-2)及临床环境来源CRKP菌株YLJGKP33(5 832 111 bp,携带blaKPC-33)的比较分析发现,三者均存在ISKpn27-blaKPC核心结构和Hin重组酶,但Tn3解旋酶仅存在于携带blaKPC-2和blaKPC-33的菌株中;rmpA2毒力因子携带率在本研究中高达55.88%(19/34),临床环境和患者来源CRKP(各1株)拉丝试验均为阳性,而老年护理医院环境来源CRKP拉丝试验均为阴性.结论 老年护理医院患者高频接触的物体表面是交叉感染的关键部位;老年护理医院环境来源CRKP所携带的耐药基因以及优势克隆群均高度集中;HLYKP45携带的blaKPC-35通过ISKpn27-blaKPC核心结构及Hin重组酶介导的遗传重组实现变异,提示由染色体介导耐药基因扩散的可能性;其表现出对头孢他啶/阿维巴坦耐药,从而加剧临床治疗难度;建议建立靶向环境消毒程序与评估、耐药分子动态监测及跨部门联防联控应对的One Health策略.