恶性疟原虫反义HRPⅡ基因荧光真核表达重组质粒的构建
CONSTRUCTION OF EUKARYOTIC EXPRESSION RECOMBINANT PLASMID OF ANTISENSE HRP Ⅱ GENE OF PLASMODIUM FALCIPARUM
摘要目的构建恶性疟原虫组氨酸富集蛋白Ⅱ(Histidine-rich protein Ⅱ,HRP Ⅱ)反义真核表达载体,为研究HRP Ⅱ反义核酸的抗疟作用奠定基础.方法应用基因重组技术,将我们已经克隆的恶性疟原虫HRP Ⅱ基因从HRP Ⅱ/pUC19反向亚克隆入荧光真核表达载体pEGFP-N3,用含卡那霉素LB培养基平板筛选转化菌,阳性重组子经Hind Ⅲ和Sac Ⅰ双酶切分析、PCR鉴定.结果恶性疟原虫HRP Ⅱ基因从HRPⅡ/pUC19重组质粒中,成功地亚克隆至真核表达载体pEGFP-N3,获得了反义HRPⅡ/pUC19重组质粒.结论恶性疟原虫HRP Ⅱ基因以反方向亚克隆入pEGFP-N3质粒,成功构建反义HRPⅡ/pEGFP-N3荧光真核表达载体,解决了HRP Ⅱ反义核酸来源问题,为下一步研究反义HPR Ⅱ的抗疟作用奠定了基础.
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