白纹伊蚊细胞色素P450 CYP6N亚家族新成员5'-及3'-非翻译区序列功能分析
FUNCTIONAL ANALYSIS OF 5' - AND 3' -UNTRANSLATED REGIONS OF NEW MEMBERS OF CYTOCHROME P450 CYP6N SUBFAMILY FROM AEDES ALBOPICTUS
摘要目的获得白纹伊蚊细胞色素P450 CYP6N亚家族新成员5'-及3'-非翻译区(untranslated region,UTR)核苷酸序列,并进行功能分析.方法以本文作者已获得的白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株一新的细胞色素P450 CYP6基因cDNA片段,设计1对特异性引物,以反向引物,进行5'-cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE),以正向引物进行3'-RACE.然后分别进行克隆、测序和鉴定,以获得5'-UTR和3'-UTR,并运用PC/GENE软件分析其功能.结果 获得CYP6N亚家族中两个新成员5'-UTR及3'-UTR;其结构特征包括:两个新成员前导序列均为46个核苷酸;起始密码子ATG两侧核苷酸-3位是A、+4位是T;5'-UTR区域无稳定性的发卡结构;终止密码子在CYP6N3为TAA、在CYP6N4为TAG,紧挨其3'端核苷酸分别为A和G,翻译产物羧基端均为亮氨酸.结论成功地获得了白纹伊蚊细胞色素P450CYP6N亚家族两个新成员5'-及3'-非翻译区序列,进一步分析表明该两个新成员均能进行有效翻译,昆虫细胞色素P450基因翻译起始调控与翻译终止调控有部分类似于脊椎动物mRNA的翻译调控,但具有多态性的特点.
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