换一批
换一批产志贺毒素大肠杆菌O138 stx2e基因的克隆与序列分析
Cloning and sequence analysis of the stx2e gene of Shiga toxin-producing Escherichia coli O138
摘要目的构建产志贺毒素大肠杆菌O138 stx2e基因重组质粒,并比较不同型Stx之间的区别.方法根据GenBank发表的stx2e序列设计了一对特异性引物,用PCR的方法扩增从临床分离到的产志贺毒素大肠杆菌O138的stx2e基因,将其克隆到pGEM-T载体中,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,经酶切和PCR鉴定,而后进行测序.并利用DNASIS序列分析软件对GenBank报道的O22菌株和噬菌体P27的stx2e和O138菌株的stx2e基因序列进行了比较分析,并对O138的stx2e氨基酸残基序列与stx1、stx2和O22菌株stx2e序列进行比较.结果所克隆的O138的stx2e与O22菌株和噬菌体P27的stx2e在碱基序列上同源性达到99.6%,O138的Stx2e与O22的Stx2e在氨基酸水平上其序列完全相同.Stx2e与stx2的同源性在85%以上,而stx2e与stx1的同源性只有42%左右.结论克隆了stx2e基因,为研究stx2e的结构和功能奠定了基础.
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