细粒棘球绦虫转Eg95-EgA31融合基因苜蓿疫苗免疫BALB/c小鼠后脾T淋巴细胞亚群的动态观察

Dynamic observation on splenocytes subsets in mice immunized with the transgenic alfalfa vaccine containing Eg95-EgA31 fusion gene of Echinococcus granulosus

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摘要目的动态观察细粒棘球绦虫转Eg95-EgA31融合基因苜蓿疫苗免疫小鼠后诱导的脾T淋巴细胞亚群的变化.方法热絮凝法提取转基因苜蓿疫苗叶蛋白,将其浓度配制成20μg/μL,132只BALB/c小鼠随机分为3组,用100μL(约含1μg融合抗原)灌胃接种和10μL(约含0.1μg融合抗原)滴鼻接种分别免疫小鼠,每3 d 1次,连续免疫2个月,同时设非转基因苜蓿叶蛋白滴鼻免疫对照组.在末次免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16、18和20周各组随机剖杀4只小鼠,取脾,分离脾细胞,流式细胞仪(FCM)检测脾CD_4~+和CD_8~+T淋巴细胞亚群的百分比.结果灌胃接种组小鼠脾CD_4~+和CD_8~+T细胞亚群分别在免疫后6～10周和4～12周升高,分别在免疫后6周和8周达高峰,百分比分别为0.294±0.002和0.168±0.027;滴鼻接种组小鼠脾CD_4~+和CD_8~+T细胞亚群分别在免疫后4～6周和4～10周升高,分别在免疫后6周和8周达高峰,百分比分别为0.318±0.051和0.197±0.008.结论 CD_4~+和CD_8~+T细胞亚群在细粒棘球绦虫转Eg95-EgA31融合基因苜蓿疫苗诱导的保护性免疫机制中起重要作用.