换一批
换一批基于TaqMan探针的双重荧光定量PCR方法检测海产品中的副溶血弧菌
Detection of Vibrio parahaemolyticus in seafoods by duplex real-time quantitative PCR targeting genes tlh and tdh
摘要目的 建立海产品中副溶血弧菌检测的双重荧光定量PCR体系.方法 针对副溶血弧菌种特异性基因tlh和tdh设计引物和TaqMan探针,建立双重荧光定量PCR体系,进行特异性与敏感性研究;利用该体系检测海产品中的副溶血弧菌.结果 副溶血弧菌可得到特异性扩增,而其它与副溶血弧菌共存于海产品中的细菌均未见扩增曲线.副溶血弧菌与其它细菌的混合DNA检测表明,其它细菌基因组的存在时并不干扰副溶血弧菌检测.副溶血弧菌典型菌株FJ14和BJ97的敏感性试验显示,该体系的最低检测DNA浓度分别为49.8pg与77.8pg,最低检测细菌浓度为56CFU/mL和371CFU/mL.对舟山菜市场采集的50份样本检测表明,32份为tlh基因阳性,3份为tdh基因阳性,与传统方法的检测结果相同.结论 与传统检测方法相比,副溶血弧菌的双重荧光定量PCR检测方法快速准确,结果直观.
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分类号
S917.1
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1002-2694.2010.05.013
发布时间
2010-07-06
基金项目
浙江省重大科技专项项目（2008C12SAA00010）
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