换一批
换一批刚地弓形虫RH株速殖子对小鼠结肠癌细胞ct26体外增殖和细胞周期的影响
Effects of Toxoplasma gondii tachyzoites on proliferation and cell cycle of mouse colon cancer cells ct26
摘要目的 研究刚地弓形虫RH株速殖子对小鼠结肠癌ct26细胞体外增殖和细胞周期的影响,并探讨其作用的分子机制.方法 取对数生长期的小鼠结肠癌ct26细胞,建立弓形虫与ct26复合感染度(moi)分别为 1∶1、2∶1、4∶1、8∶1、16∶1的共培养试验模型,台盼兰排斥试验连续7 d绘制细胞生长曲线;流式细胞仪检测8∶1共培养模型组6 h、12 h、24 h、48 h细胞周期改变;采用半定量RT-PCR方法分别检测ct26细胞cyclinB1、cdc2 基因转录水平变化;Western blot 方法检测细胞周期蛋白cyclinB1蛋白水平变化.结果 台盼兰排斥试验发现各比例组弓形虫均能有效抑制小鼠ct26细胞的体外增殖,且呈现前4 d缓慢抑制,4 d后细胞大量死亡的现象,以8∶1模型组的增殖抑制作用最明显,感染7 d后细胞抑制率达80.77%(P<0.01);流式细胞仪检测发现8∶1模型组弓形虫可在各作用时间明显改变ct26细胞周期分布,使G0/G1期细胞百分比下降,G2/M期百分比显著升高(P<0.01),24 h达到作用高峰,使G2/M期百分比升高12.77%,48 h则细胞G2/M期百分比下降;弓形虫感染ct26细胞3～24 h,细胞cdc2转录水平在各个时间点未见明显变化,细胞cyclinB1从转录水平和蛋白水平均呈现为感染3 h时表达增强,随后各时间点均明显降低的现象,cyclinB1基因转录水平在感染后24 h只达到对照组的16.55%.结论 弓形虫RH株速殖子可明显抑制小鼠结肠癌ct26细胞体外增殖,感染前期以诱导细胞发生G2/M期阻滞为主要机制,细胞周期蛋白cyclinB1活性下降在G2/M期阻滞中起主要作用.
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