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尼帕病毒巢式RT-PCR方法的建立和初步应用

Development of nested RT-PCR for detection of Nipah virus

摘要目的 建立灵敏、特异的检测尼帕病毒的巢式RT-PCR方法.方法 根据GenBank公布的尼帕病毒N基因序列,设计2对特异性引物(外引物和内引物),建立巢式RT-PCR方法,优化反应体系,测定特异性和灵敏度,并进行临床样品的检测.结果 该方法扩增的片段序列与源序列同源性均为100%.特异性试验结果表明本试验设计的内外侧引物不能从新城疫病毒、牛瘟病毒和日本乙型脑炎病毒中扩增出条带.敏感性试验结果表明,该方法最低能检测出的标准模板RNA浓度为39 fg/μL.100份临床样品检测结果全部为阴性.结论 初步建立了快速、灵敏、特异的检测尼帕病毒N基因的巢式RT PCR方法,可用于动物疫病监测和检验检疫等领域.

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作者 张体银 [1] 张志灯 [1] 郑腾 [1] 白泉阳 [1] 王武军 [1] 林素洁 [1] 学术成果认领
作者单位 福建省检验检疫重点实验室,福建出入境检验检疫局,福州 350001 [1]
栏目名称
DOI 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2014.06.011
发布时间 2014-08-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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中国人兽共患病学报

中国人兽共患病学报

2014年30卷6期

599-602页

ISTICPKUCSCDCA

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