应用不对称PCR提高PRRSV-CSFV-JEV共检芯片的杂交效率

Enhancing the hybridization efficiency of the PRRSV-CSFV-JEV microarray by asymmetric PCR

二维码有效期 120s

摘要目的比较采用普通RT-PCR和不对称PCR分别进行样品的直接荧光标记,应用于cDNA芯片杂交,分析其对芯片杂交效率的影响.方法以本实验室建立保存的重组质粒和病毒为模板,进行不对称RT-PCR引物浓度优化,应用普通RT-PCR与不对称RT-PCR进行直接荧光标记,将标记的产物与制备的cDNA芯片杂交,在相同条件下完成杂交后芯片的洗涤与扫描,记录扫描图片与数据.结果与普通RT-PCR标记方法相比,应用不对称RT-PCR技术标记单链靶基因,能特异有效提高芯片的杂交效率.结论应用不对称RT-PCR技术对样品进行荧光标记后,与cDNA芯片杂交能提高芯片的杂交效率,有利于cDNA芯片的检测应用.

作者张仙 ^[1] 邓静 ^[2] 常晓霞 ^[1] 杨国淋 ^[1] 马锐 ^[1] 滑翔 ^[1] 赵玉佳 ^[1] 欧阳达 ^[1] 文心田 ^[3] 学术成果认领

作者单位四川农业大学动物医学院,动物传染病与基因芯片实验室,雅安 625014 ^[1] 四川华神兽用生物制品有限公司,四川畜科生物制品有限公司,成都 610299 ^[2] 四川农业大学动物医学院,动物传染病与基因芯片实验室,雅安 625014;四川农业大学人兽共患病研究室与猪病防治研究中心,成都 611130 ^[3]

关键词不对称PCR cDNA芯片标记 asymmetric PCR cDNA microarray fluorescence labeling

主题词效率(Efficiency)荧光(Fluorescence)方法(Methods)目的(Goals)质粒(Plasmids)

分类号 Q789

栏目名称

实验研究

DOI 10.3969/j.issn.1002-2694.2016.01.011

发布时间 2016-05-17

基金项目

the Special Fund for Agro-scientific Research in the Public Interest of China（201203056）；国家公益性行业(农业)科研专项（201203056）