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MTT试验检测EV71 2A蛋白对宿主细胞损伤作用

Host cell injuries caused by 2Apro of EV71 detected by MTT assay

摘要目的 在Vero细胞、RD细胞和U87细胞3种细胞系中,研究EV71的2A蛋白对宿主细胞增殖能力的影响及对细胞的损伤作用,揭示2A蛋白在EV71的致病机制中所起的作用.方法 将野毒株EV71 SDLY 107株(强毒株)、EV71SDLY 1株(弱毒株)和嵌合毒株EV71 SDLY 107-2A-1感染Vero细胞、RD细胞、U87细胞后,利用MTT试验测定3种细胞在感染病毒后不同时间点的存活情况,绘制细胞生长曲线,比较细胞增殖程度,并利用单因素方差分析法分析3种细胞在感染不同病毒48 h后的存活率;结果 EV71 SDLY 107株感染Vero细胞和RD细胞后细胞增殖程度和存活率均低于EV71 SD-LY 1株(t=41.64,P<0.001;t=33.28,P<0.001);EV71 SDLY 107-2A-1嵌合株感染Vero细胞和RD细胞后,细胞增殖程度和存活率均高于亲本病毒EV71 SDLY 107株,低于EV71 SDLY 1株(t=17.97,P<0.001;t=42.09,P<0.01);EV71 SD-LY 107-2A-1株感染U87细胞后细胞存活率低于EV71 SDLY 1株(t=8.85,P<0.001),但与EV71 SDLY 107株感染后细胞存活率无统计学差异(t=0.74,P=0.603);不同细胞感染同株病毒48 h后,U87细胞存活率均为最低,Vero细胞存活率均为最高.结论 EV71强毒株的2A蛋白对细胞产生的损伤作用大于弱毒株的2A蛋白,提示2A蛋白在EV71对宿主细胞的作用中发挥功能.

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中国人兽共患病学报

中国人兽共患病学报

2016年32卷6期

525-528页

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