单增李斯特菌inl A/inl B双基因缺失株生长特性观察及对小鼠致病性研究

Biological characters and pathogenicity of Listeria monocytogenes △inlA/△inlB double gene deletion strains

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摘要目的探究单增李斯特菌inl A/inl B双基因缺失株的生物学特性.方法通过体外胁迫培养条件下OD600测定以及小鼠感染试验,对Lm 90-△inlAB和Lm 90的抗胁迫能力及细菌致病力进行研究.结果低温(4℃、30℃)环境下,Lm 90和Lm 90-△inlAB生长差异无统计学意义(t4℃=0.057,P＞0.05;t30℃=0.441,P＞0.05),适温37℃及42℃高温环境下,Lm 90-△inlAB较Lm 90生长受到抑制,生长差异具有统计学意义(t37℃=0.763,P＜0.05;t42c =1.147,P＜0.05);体外耐酸碱试验中,Lm 90-△inlAB耐酸性未明显改变,而耐碱能力强于亲本株Lm 90,生长差异具有统计学意义(pH=9时t=2.837,P＜0.05);在含有3.5％酒精的BHI培养基及含5％NaCl高渗BHI培养基中,Lm 90-△inlAB增长趋势明显低于Lm 90,生长差异具有统计学意义(t酒精=1.422,P＜0.05;tNacl=1.382,P＜0.05),Lm 90-△inlAB对酒精及高盐的耐受力显著低于Lm90;小鼠毒力测定结果表明,Lm 90△inlAB与Lm 90半数致死量分别为106394CFU、105.68CFU,Lm 90-△inlAB毒力下降明显,在不同检测时间点Lm 90-△inlAB在小鼠肝脏和脾脏内的载菌量均少于Lm 90,载菌量差异具有统计学意义(t肝=2.454,P＜0.05;t脾=2.443,P＜0.05).结论 Lm的抗胁迫能力可能随着基因的缺失发生显著改变,内化素InlA/InlB与单增李斯特菌侵染宿主的能力有一定的调控作用.缺失株生物学特性测定对研究Lm胁迫环境生存及毒力因子的致病机理提供了科学依据.

作者任静静 ^[1] 杨铭伟 ^[1] 陈云飞 ^[1] 蒋建军 ^[1] 王鹏雁 ^[1] 学术成果认领

作者单位石河子大学动物科技学院,石河子,832000 ^[1]

关键词单核细胞增生性李斯特菌 inlA基因 inlB基因环境耐受毒力 Listeria monocytogenes inlA gene inlB gene environment tolerance virulence

主题词毒力(Virulence)基因(Genes)生长(Growth)小鼠(Mice)环境(Environment)

分类号 R378.99

栏目名称论著

DOI 10.3969/j.issn.1002-2694.2016.06.005

发布时间 2016-08-02

基金项目

国家自然科学基金项目 家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金课题项目 石河子大学高层次人才科研启动项目(No.RCZX201104)联合资助 Supported by the Program of the National Natural Science Foundation of China the Open Fund Project of State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology the High Level Talents Scientific Research Project of Shihezi University