胃黏膜组织中恶臭假单胞菌临床意义的探讨

Investigation of clinical significance of Pseudomonas putida isolated from gastric biopsies

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摘要目的探索恶臭假单胞菌在幽门螺杆菌感染相关胃肠疾病中的意义.方法采集14C尿素呼气试验阳性患者病变胃黏膜354例,进行细菌的分离培养.根据菌落形态、革兰染色、尿素酶试验及幽门螺杆菌特异性16S rRNA基因片段的PCR进行幽门螺杆菌的鉴定,同时提取胃黏膜组织DNA,通过幽门螺杆菌特异性PCR进行快速诊断.将非幽门螺杆菌转种于营养琼脂培养基,进行快速尿素酶试验.尿素酶阳性的非幽门螺杆菌染色体DNA利用细菌16S rRNA基因通用引物进行PCR扩增、测序及序列比对.使用全自动细菌鉴定仪对经测序比对为恶臭假单胞菌的菌株进行鉴定.采用K-B纸片扩散法进行药物敏感性试验.结果从354例样本中分离出革兰阴性、尿素酶阳性的恶臭假单胞菌10株,经16S rRNA基因测序和序列比对,与GenBank中恶臭假单胞菌的相似性≥98％.10株恶臭假单胞菌的胃黏膜标本中,6例标本幽门螺杆菌特异性PCR为阳性,4例为阴性.传代存活的7株恶臭假单胞菌的K-B法药物敏感试验显示对左氧氟沙星均敏感,1株对四环素敏感,5株对阿莫西林耐药,6株对克拉霉素耐药,7株对甲硝唑、氨苄青霉素均耐药.7株菌经全自动细菌生化鉴定仪鉴定结果均为恶臭假单胞菌.结论病变胃黏膜中分离出尿素酶阳性且对治疗幽门螺杆菌感染的多种抗生素耐药;可能造成临床上14 C-尿素呼气试验假阳性,并继发感染影响胃肠疾病的进展.

作者印琳 ^[1] 刘芳 ^[2] 郭长城 ^[2] 王琼 ^[2] 杨杰 ^[3] 潘科 ^[4] 潘晨 ^[3] 熊妍 ^[5] 陈颖婷 ^[3] 学术成果认领

作者单位贵州医科大学医学检验学院临床生化教研室,贵阳550004;贵州医科大学基础医学院微生物学教研室,贵阳550025 ^[1] 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室,贵阳,550025 ^[2] 贵州医科大学附属医院消化内科,贵阳,550004 ^[3] 黔南布依族苗族自治州人民医院消化内科,都匀,558000 ^[4] 贵阳市儿童医院消化内科,贵阳,550000 ^[5]

关键词恶臭假单胞菌培养尿素酶 16S rRNA 耐药性 Pseudomonas putida culture urease 16S rRNA drug resistance

主题词恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)尿素酶(Urease)胃黏膜(Gastric Mucosa)组织(Tissues)幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)

分类号 R378

栏目名称

实验研究

DOI 10.3969/j.issn.1002-2694.2016.012.011

发布时间 2017-03-13

基金项目

the National Natural Science Foundation of China（81460314）； the Guiyang Municipal Health and Family Planning Commission,Science and Technology Project,2014(No.018)国家自然科学基金资助项目（81460314）；贵阳市卫生和计划生育委员会科学技术计划项目（[2014]筑卫计科技合同字第018号）