换一批
换一批新城疫病毒核蛋白单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA的初步建立
Development of monoclonal antibodies against nucleoprotein of Newcastle disease virus and establishment of a quantitative double-antibody sandwich ELISA for NDV antigen
摘要目的 制备新城疫病毒(NDV)核蛋白(NP)的单克隆抗体(单抗),并用于建立一种可定量检测NDV病毒含量的双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测方法(NDV NP ELISA).方法 基于NDV病毒株F48E9获得NP基因,经原核表达方式制备出重组抗原rNP;免疫小鼠制备NDV NP特异性单抗;单抗经HRP标记和配对筛选,建立NDV NP ELISA,分析其特异性、灵敏度、精密度、准确度和检测线性,并分析本方法定量检测的NP含量与PFU病毒滴度的定量相关性.结果 建立基于单抗3C10和4E7的NDV NP ELISA,其定量检测NDV rNP的最佳线性范围为0.015～0.250 μg/ml(R2=0.9974),回收率在88.4％～106.01％,变异系数小于3.4％;该方法具有良好特异性;该方法定量检测NDV抗原含量与PFU病毒感染滴度有较好的相关性(R2 =0.9209).结论 建立NDV NP ELISA,可准确定量检测NDV病毒中的NP抗原含量,为NDV病毒含量的测定提供一种可靠简便的分析方法.
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关键词
新城疫病毒核蛋白单克隆抗体定量检测酶联免疫吸附测定Newcastle disease virusNP proteinmonoclonal antibodyquantitative assayenzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)
主题词
新城疫病毒(Newcastle disease virus)蛋白(Egg White)抗体, 单克隆(Antibodies, Monoclonal)抗体(Antibodies)方法(Methods)
分类号
R372
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1002-2694.2017.06.002
发布时间
2017-08-24
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