换一批
换一批牛分枝杆菌mpb51-mpb70融合基因的原核表达与抗原活性初步鉴定
Prokaryotic expression of the Mycobacterium bovis fusion gene mpb51-mpb70 and preliminary identification of antigenic activity
摘要目的 通过获得牛分枝杆菌保护性抗原MPB51、MPB70的融合蛋白MPB51-MPB70,以提高单一蛋白的抗原性.方法 采用重叠拼接PCR技术将牛分枝杆菌mpb51与mpb 70基因融合,获得融合基因mpb51-mpb70,克隆至pMD19中,构建重组质粒pMD-51-70.酶切、纯化后连接至pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET-51-70.通过SDS-PAGE和Westernblotting分析、鉴定融合蛋白的表达及抗原性.以间接ELISA比较MPB51、MPB70、MPB51-MPB70的抗原性.结果 表达、纯化了45 ku的融合蛋白MPB51-MPB70,并与牛结核血清发生特异性反应,且比单一蛋白反应性强.结论 成功地获得了具有良好抗原性的牛分枝杆菌融合蛋白MPB51-MPB70.
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栏目名称
实验研究
DOI
10.3969/j.issn.1002-2694.2018.00.142
发布时间
2018-11-22
基金项目
国家自然科学基金
吉林省科技发展计划项目
吉林省教育厅科学技术研究项目
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