换一批
换一批表达鼠疫菌F1抗原的重组芽孢的制备及口服免疫效果观察
Preparation and immunogenicity analysis of a recombinant Bacillus Subtilis spore-based plague vaccine
摘要目的 利用枯草杆菌芽孢展示外源蛋白的呈递技术,研究表面展示鼠疫菌保守抗原F1蛋白的重组芽孢,分析评价重组芽孢的免疫原性.方法 将枯草杆菌CotB基因构建到pDG1664质粒,再将鼠疫菌保守序列F1蛋白编码基因连接到CotB基因的下游,构建成重组质粒.然后将外源基因CotB-F1同源重组整合到PY-79枯草杆菌基因组中.经PCR、Western Blot方法鉴定重组芽孢中鼠疫F1蛋白的表达.用上述重组芽孢以无佐剂口服方式免疫小鼠.采用ELISA方法检测重组芽孢免疫小鼠的免疫效果.结果 本研究制备出表面表达CotB-F1融合蛋白的重组枯草杆菌芽孢.用重组芽孢和野生型芽孢口服免疫BALB/c小鼠.实验结果表明,重组芽孢免疫组产生了针对鼠疫F1抗原的特异性抗体.重组芽孢免疫小鼠能产生有效的免疫应答.结论 本研究制备出表面展示鼠疫F1蛋白的枯草杆菌芽孢,建立了枯草杆菌芽孢呈递技术方法,为发展口服鼠疫疫苗奠定了基础.
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