换一批
换一批牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿BP亚基单克隆抗体胶体金标记试纸条制备
Preparation of colloidal gold-labeled strip of monoclonal antibody against BP subunit of PI-2a pili islands of bovine mastitis Streptococcus agalactiae
摘要目的 本研究通过优化牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿BP亚单位单克隆抗体的性能,制备胶体金标记检测牛乳腺炎无乳链球菌的试纸条.方法 利用pET30a(+)-BP重组质粒表达蛋白纯化物免疫小鼠,无菌取脾细胞与sp2/0骨髓瘤细胞融合,筛选杂交瘤细胞,制备单克隆抗体,对单克隆抗体进行胶体金标记后制备检测试剂盒,并确定其灵敏度、特异性等技术指标.结果 经数轮筛选,获得1株阳性杂交瘤细胞株,抗体效价达到1∶256 00.胶体金标记试纸条灵敏度量达到106 CFU/mL.特异性测试结果表明,胶体金标记试纸条与金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、副结核杆菌、化脓性链球菌培养物人工污染的牛乳样均无阳性反应,只与无乳链球菌乳样出现阳性结果.结论 该胶体金标记免疫层析试纸条,具有实际应用价值,将为牛乳腺炎的筛查检测提供新型、便捷的技术产品.
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主题词
胶体金(Gold Colloid)无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)抗体, 单克隆(Antibodies, Monoclonal)乳腺炎, 牛(Mastitis, Bovine)基因(Genes)
分类号
R378.1
栏目名称
实验研究
DOI
10.3969/j.issn.1002-2694.2019.00.186
发布时间
2020-05-07
基金项目
内蒙古自治区科技厅社会发展领域计划项目
国家自然科学基金项目
内蒙古自治区乳源性致病菌防控工程技术研究中心开放课题
内蒙古自治区第七批“草原英才”人才工程产业创新团队建设项目
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