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一种快速鉴别牛肉中大肠杆菌O157∶ H7检测方法的建立及应用

Establishment and application of a rapid detection method for Escherichia coli O157 ∶ H7 in beef

摘要目的 建立一种快速、准确检测牛肉中大肠杆菌O157∶H7的方法.方法 利用抗大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体2G5(捕获抗体),酶标单克隆抗体2E3(HRP-2E3,检测抗体),建立可用于检测大肠杆菌O157∶H7的双抗体夹心ELISA方法,同时对反应条件进行优化并对该方法进行评价.结果 通过优化得到最佳反应条件,单克隆抗体2G5最佳包被浓度为4.48μg/mL,HRP-2E3最佳检测浓度为19.9μg/mL.该方法对纯培养菌液最低检出限为1×105 CFU/mL,具有良好的敏感性,且特异性良好,与其他大肠杆菌、沙门氏菌、李斯特菌等均无交叉反应.板内及板间变异系数均小于7%,具有较高的精密度.人工污染牛肉样品增菌8h后,对大肠杆菌O157∶H7的检出限为1 CFU/25 9.结论 建立的双抗体夹心ELISA检测方法灵敏度、准确度、重复性良好,特异性强,可用于临床实际样品检测.

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作者 赵亚男 [1] 曾德新 [1] 郭德华 [2] 蒋原 [2] 蒋鲁岩 [3] 李鑫妮 [4] 陈伟 [4] 汤芳 [1] 薛峰 [1] 戴建君 [1] 学术成果认领
作者单位 南京农业大学动物健康与食品安全国际合作实验室,南京,210095 [1] 上海海关动植物与食品检验检疫技术中心,上海,200135 [2] 南京海关动植物与食品检测中心,南京,210001 [3] 合肥工业大学食品与生物工程学院,合肥,230601 [4]
分类号 S852.61
栏目名称 论著
DOI 10.3969/j.issn.1002-2694.2020.00.036
发布时间 2020-06-12
基金项目
“十三五”国家重点研发计划重点专项 南京海关科研项目 江苏省农业自主创新项目(No.CX
  • 浏览81
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2020年36卷4期

272-279,296页

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