1株李斯特菌噬菌体的分离、保存及生物学特性研究

Isolation,preservation,and biological characteristics analysis of a Listeria bacteriophage

二维码有效期 120s

摘要目的从食品销售环境样本中分离李斯特菌噬菌体,并对分离获得的噬菌体进行电镜形态观察、宿主谱及生物学特征分析.方法采用双层琼脂平板法和点滴法,以分离的英诺克李斯特菌Lin08作为宿主菌,成功分离并鉴定出一株烈性噬菌体LMLPA5,使用透射电镜观察噬菌体形态,并测定噬菌体的宿主谱、最佳感染复数(MOI)、一步生长曲线以及理化稳定性,同时探索噬菌体在4 ℃、-20 ℃及-80 ℃下的保存效果.结果分离获得的LMLPA5噬菌体属于肌尾噬菌体科,其形成的噬菌斑清晰透明,周围无晕环.该噬菌体为广谱的李斯特菌烈性噬菌体,能裂解多个李斯特菌种及单增李斯特菌多个血清型菌株.LMLPA5的最佳MOI为0.1,潜伏期为10 min,平均裂解量为95.2 PFU/cell.LMLPA5对高温较敏感,在70℃暴露1 h即完全失活,而在4 ℃～40 ℃作用32 h以上噬菌体仍能保持稳定.在pH为4～10 LMLPA5的活性不受影响,经紫外线照射60 min后噬菌体被完全灭活.LMLPA5对氯仿不敏感,为无囊膜型噬菌体.噬菌体在4 ℃及-80 ℃的保存效果较好,可稳定保存8个月以上.结论本研究获得的1株广谱李斯特菌肌尾噬菌体LMLPA5具有较强的裂解能力、抵抗力和稳定性,为进一步的应用提供了基础.

作者 刘凌云 ^[1] 毛盼 ^[2] 陈晋妮 ^[2] 李玲玲 ^[2] 王艳 ^[2] 宋敬东 ^[3] 陈峥宏 ^[4] 叶长芸 ^[2] 学术成果认领

作者单位贵州医科大学基础医学院微生物学教研室,贵州省病原生物学特色重点实验室,贵阳 550025;中国疾病预防控制中心传染病预防控制所,传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室,北京 102206 ^[1] 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所,传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室,北京 102206 ^[2] 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室,北京 100052 ^[3] 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室,贵州省病原生物学特色重点实验室,贵阳 550025 ^[4]

关键词李斯特菌噬菌体裂性噬菌体生物学特性 Listeria bacteriophage lytic phage biological characteristics

分类号 R383.3

栏目名称 实验研究

DOI 10.3969/j.issn.1002-2694.2024.00.072

发布时间 2024-07-18