换一批多交叉置换扩增结合纳米生物传感器检测伊氏李斯特菌的方法建立
Multiple cross displacement amplification coupled with a gold nanoparticle-based lateral flow biosensor for detection of Listeria ivanovii
摘要目的 应用多交叉置换扩增技术结合纳米生物传感器(multiple cross displacement amplification coupled with gold nanoparticle-based lateral flow biosensor,MCDA-LFB)建立一种快速、特异和灵敏的伊氏李斯特菌(Listeria ivanovii,L.ivanovii)检测方法,并对该方法进行评价.方法 以L.ivanovii种特异性基因smcl为靶标设计引物,对引物进行最佳反应温度、灵敏度和特异性测试,并用模拟样本和实际样本进行评估.结果 L.ivanovii-MCDA-LFB的最佳反应温度为64 ℃.在L.ivanovii和non-L.ivanovii菌种鉴定中,该方法特异性为100％.此外,L.ivanovii-MCDA-LFB在纯培养物和模拟污染粪便样本的灵敏度分别为10 fg/反应和6.8×102 CFU/g.在195份野鼠粪便样本增菌培养物检测中,L.ivanoviiMCDA LFB检测结果和传统培养法(ISO 11290-1)结果相同,且只需二次增菌液水煮模板即可检出.结论 L.ivanovii-MCDA-LFB方法作为一种快速、灵敏和特异的诊断方法可应用于食品、医疗和科研领域.
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关键词
伊氏李斯特菌多交叉置换扩增纳米生物传感器smcl基因最低检测限Listeria ivanoviimultiple cross displace-ment amplificationlateral flow biosensorsmcl genelimit of detection
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1002-2694.2024.00.098
发布时间
2024-09-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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