换一批布鲁氏菌超快速荧光PCR方法建立与临床应用
Establishment and application of ultra-fast real-time PCR for Brucella detection
摘要目的 建立布鲁氏菌超快速荧光PCR检测方法,应用于临床样品的快速检测.方法 以外源性重组质粒为内参,选取布鲁氏菌重要毒力因子T4SS分泌系统为靶基因设计引物、探针,建立布鲁氏菌超快速荧光PCR检测方法.评价该方法的灵敏度、特异性、重复性,绘制标准曲线,与荧光PCR方法检测临床样品比较符合率.结果 该方法检测时间短,10 min即可完成.标准曲线Y=-3.410 7x+38.357,R2=0.998 5,线性关系良好,最低检测限为10 copies/μL.该方法具有良好的特异性,对布鲁氏菌以外的几个临床常见细菌均无特异性扩增.检测3种浓度的阳性质粒,CV值为0.20％～0.91％,说明该方法具有极好的重复性.与荧光PCR方法同时检测140份临床样品,结果完全一致,符合率100％.结论 本研究建立了一种用时短、特异性强、灵敏度高、重复性好布鲁氏菌超快速荧光PCR检测方法,可用于布鲁氏菌临床检测和疫情紧急排查,对布鲁氏菌早期诊断具有重要意义.
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分类号
R382.2（医学寄生虫学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1002-2694.2025.00.40
发布时间
2025-06-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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