换一批基于重组酶聚合酶等温扩增的间日疟快速可视化检测研究
Recombinase polymerase amplification combined with a lateral flow dipstick for rapid and visual detection of Plasmodium vivax
摘要目的 基于重组酶聚合酶等温扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)技术及侧流层析试纸条(lateral flow dipstick,LFD)建立一种快速、可视化检测间日疟原虫的方法,并进行检测效果评价.方法 以间日疟原虫18S rRNA 基因保守序列(GenBank:DQ660817.1)为靶序列,利用Primer Premier 5设计引物和探针,以间日疟原虫标准质粒(pUCPv)为模板进行RPA和LFD检测,建立敏感、特异的间日疟原虫核酸RPA-LFD快速可视化检测方法.用RPA-LFD检测浓度为1×103、1×102、1×101、1×100、1×10-1 copies/μL的pUCPv,评价其灵敏度;用RPA-LFD检测恶性疟、三日疟、卵形疟、内脏利什曼病患者及健康参与者全血DNA,评价其特异性,并利用该方法检测24例确诊间日疟患者全血DNA样本,评价其敏感性.结果 建立了敏感、特异、快速可视化检测间日疟核酸的RPA-LFD方法,该方法能够在39℃恒温条件下20 min内完成对间日疟原虫的检测,灵敏度可达1 copy/μL,与其他疟原虫、内脏利什曼原虫无任何明显交叉反应,特异性为100%.24例确诊间日疟患者的DNA样本检测阳性率为100%.结论 建立的检测间日疟原虫核酸的快速可视化RPA-LFD方法敏感性高、特异性好、操作简便,且只需简易加热装置即可进行,适用于低资源环境下间日疟原虫的快速检测.
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关键词
间日疟原虫重组酶聚合酶等温扩增侧流层析试纸条快速检测Plasmodium vivaxrecombinase polymerase amplificationlateral flow dipstickrapid detection
分类号
R382.31（医学寄生虫学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1002-2694.2025.00.078
发布时间
2025-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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