旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂对黑色素瘤细胞的体外抑制作用研究
Investigating the in vitro inhibitory effects of a Trichinella spiralis serine protease inhibitor on melanoma cells
摘要目的 探究旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂(Ts-serpin)对黑色素瘤B16-F10细胞的抑制作用,为开发新型黑色素瘤治疗药物和治疗策略提供理论依据.方法 构建Ts-serpin的真核表达质粒并转染B16-F10细胞;利用SDS-PAGE凝胶电泳和Western blotting鉴定Ts-serpin-EGFP重组蛋白在B16-F10细胞中的表达;经ATP生物发光法、细胞划痕实验和流式细胞术等试验,分析Ts-serpin对B16-F10细胞增殖、迁移、细胞周期、凋亡与坏死的调节作用.结果 Ts-serpin-EGFP重组蛋白在B16-F10细胞浆中成功表达;重组质粒转染后的B16-F10细胞的增殖能力降低(t=7.892,P<0.01),细胞迁移率降低(t=59.0,P<0.01);相较于正常对照组,重组质粒转染后B16-F10的G1期细胞减少(q=6.76,P<0.05),S期细胞增加(q=12.85,P<0.01),细胞坏死率增加(q=9.43,P<0.05).结论 Ts-serpin能够抑制B16-F10细胞的增殖、降低其迁移和促进细胞坏死,Ts-serpin对B16-F10细胞具有抑瘤作用.
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