换一批马尔堡病毒双重实时荧光定量PCR检测方法的建立
Establishment of a dual real-time fluorescence quantitative PCR method for detection of marburg virus
摘要目的 建立一种可检测马尔堡病毒(marburg virus,MARV)双重实时荧光定量RT-PCR方法.方法 根据不同MARV流行株的MNP、MGP基因的差异,设计5对引物及5条探针,构建合适的检测体系,采用MARV核酸检测试剂国家参考品对阳性参考品符合率、阴性参考品符合率、精密度和最低检测限进行验证.结果 对19支国家参考品进行检测,其中6支阳性参考品结果为:P1-1、P2-1、P3-1阳性参考品FAM通道(即MNP基因)阳性,P1-2、P2-2、P3-2阳性参考品VIC通道(即MGP基因)阳性.阳性符合率为100％.7支阴性参考品结果为:N1～N5、B1、C3-1阴性参考品均为阴性,阴性符合率为100％.5支最低检测限参考品结果为:S1～S4呈现检测梯度,均为阳性;S5为阴性.本方法的最低检测限预计低于1.4×104 copies/mL(MNP基因)和2.0×104 copies/mL(MGP基因).精密度参考品R用无核酸酶水按1:10稀释后,平行提取10次,各通道Ct的CV均小于5％.结论 本研究构建的MARV双重实时荧光定量RT-PCR方法具有较好的特异性、灵敏度、可重复性,且符合国家参考品的质量标准,适用于各基层疾控及医疗机构.
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关键词
马尔堡病毒国家参考品实时定量荧光PCR法丝状病毒科marburg virusnational reference materialreal-time quantitative fluorescence PCRFiloviridae
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1002-2694.2026.00.063
发布时间
2026-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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