换一批
换一批稻曲病菌 T-DNA 插入突变体 B2510的插入位点分析
Molecular Characterization of Ustilaginoidea virens T-DNA Insertion Mutant B2510
摘要以稻曲病菌 T-DNA 插入突变体库中致病力减弱突变菌株 B2510为材料,通过分析 T-DNA 插入位点的侧翼序列和突变基因,分离出在稻曲病菌致病过程中起作用的基因.通过测定突变菌株 B2510的生长速率、产孢能力及致病力发现,与野生型菌株 P1相比,B2510田间接种表现为致病性减弱；在 MM 培养基上生长速率下降,而在 PSA 和 TB3培养基中生长速率与野生型没有显著差异,但丧失产孢能力.Southern 杂交显示 T-DNA 在突变菌株 B2510中以双拷贝形式插入,利用TAIL-PCR 技术扩增紧邻 T-DNA 两侧的侧翼序列,经过比对分析发现,T-DNA 分别插在基因 UV8b _1412的启动子区域和UV8b _1386的下游3′端,且稻曲菌基因组序列均未丢失,T-DNA 上只有几个碱基发生变化.半定量 RT-PCR 分析基因的表达情况,显示两个基因在突变体 B2510的表达量较 P1均显著下降,推测 T-DNA 插入位点处的基因与稻曲病菌致病性相关,可能在某一阶段参与调控稻曲病菌在水稻上的致病过程.
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关键词
稻曲病菌T-DNA 插入突变ATMT 转化致病力侧翼序列Ustilaginoidea virensT-DNA insertion mutantATMT transformationpathogenicityflanking sequence
栏目名称
DOI
10.16819/j.1001-7216.2016.5198
发布时间
2016-10-12
基金项目
江苏省农业科技自主创新基金资助项目（CX(15)1054）；
国家自然科学基金资助项目（31301624）
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