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利用CRISPR/Cas9技术创制Rc基因恢复红稻

Breeding of Rc Function Restoration Red Rice via CRISPR/Cas9 Mediated Genome Editing

摘要[目的]将栽培稻品种恢复为米质优、抗逆性强的红稻具有较大的研究价值.利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,编辑原花青素转录调节因子Rc基因,恢复红种皮特性,以改良水稻米质,提升抗逆性.[方法]利用CRISPR/Cas9技术,以Rc为靶基因,构建突变载体pYLCRISPR/Cas9-Rc-gRNA,以空育180、上育453为材料,转化获得转基因植株,通过测序手段和表型观察验证成果.[结果]分子水平检测获得Rc突变材料2种,其中KY-1在1414―1417 bp缺失4个碱基,终止子突变为苯丙氨酸;SY-1在1411 bp处缺失1个碱基,终止子突变为天冬氨酸.2种编辑材料均恢复为红米表型,且具有一定耐盐碱能力.[结论]利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功获得恢复红种皮表型的纯合株系,为红米改良提供基础材料.

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