重组毕赤酵母胸腺肽α1-人血清白蛋白基因工程菌高密度发酵及分离纯化
High cell density fermentation and purification of recombinant Pichia Pastoris Tα1-HSA genetically engineered bacteria
摘要目的 研究重组毕赤酵母胸腺肽α1-人血清白蛋白(Tα1-HSA)基因工程菌在30 L发酵罐中高密度发酵表达Tα1-HSA融合蛋白的发酵工艺及产物的分离纯化方法.方法 采用两步发酵法进行重组毕赤酵母Tα1-HSA基因工程菌的高密度发酵.发酵液经超滤浓缩,阴离子交换色谱,亲和色谱,凝胶过滤色谱等步骤进行分离纯化.结果 发酵结束后,菌体细胞湿重达到350 g/L,发酵液中蛋白产量达到2.0 g/L.发酵液经分离纯化后获得了纯度较高的重组Tα1-HSA融合蛋白,HPLC分析纯度达97.5%.结论 重组毕赤酵母Tα1-HSA基因工程菌高密度发酵的成功及分离纯化方法的建立为Tα1-HSA的进一步研究和开发奠定了基础.
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