pCDNA3-AADC真核表达载体的构建及其在原代培养骨骼肌细胞中的表达
Construction of eukaryotic expression vector pCDNA3-AADC and it's expression in cultured primary muscle cells
摘要目的将人类神经元性芳香族氨基酸脱羧酶(AADC)基因构建于含CMV启动子的真核表达载体pCD-NA3上,并检测其在原代培养骨骼肌细胞中的表达.方法采用分子克隆技术将经测序证实的人神经元性AADC基因片段同真核表达载体pCDNA3连接,酶切鉴定并筛选出正向连接重组体,并采用脂质体转染法将其导入原代培养的骨骼肌细胞,免疫印记检测该基因的表达.结果酶切证实基因片断正向连接于PCDNA3上,并在原代骨骼肌细胞中获得表达.结论含人类神经元AADC基因的真核表达重组体可在原代培养的骨骼肌细胞中有效的表达.
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