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转染ERCC2的人脑胶质瘤细胞增加对烷化剂类抗癌药耐药性

Enhanced alkylating agent resistance through ERCC2 gene transfection in hunan glioma cell line

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摘要目的探讨切割修复交叉互补基因2(excision repair cross-complementing rodent repair deficiency gene 2,ERCC2)在人脑胶质瘤耐药中的作用.方法采用来自p2E-ER2的2.4 kbEcoR Ⅰ片段和pcDNA3载体组建成pcDNA3ERCC2质粒.再用脂质体转染技术,将pcDNA3ERCC2质粒转入SKMG-4细胞.转染ERCC2的细胞用G418连续筛选2周.再从存活的细胞集落挑取单细胞进行克隆.克隆细胞进一步增殖并经RT-PCR和Western blot证实为稳定转染细胞用于下一步试验.转染不带ERCC2的pcDNA3载体作为对照.然后,采用改良的Sulforhodamine B(SRB)抗癌药筛选法,对稳定转染和亲代SKMG-4细胞进行细胞毒试验.结果细胞毒性试验结果显示转染ERCC2的SKMG-4胶质瘤细胞对顺铂和麻法林的耐药性明显增加.顺铂的IC90(μmol/L)在亲代SKMG-4、转染pcDNA3载体的对照SKMG-4和转染ERCC2的SKMG-4细胞分别为1.175、1和1.75;麻法林的IC90(μmol/L)分别为5、5.6和9.转染ERCC2的SKMG-4细胞与转染空载体的对照细胞相比较,顺铂和麻法林的IC90分别增加了75%和61%.结论转染ERCC2基因的胶质瘤细胞对顺铂和麻法林的耐药性明显增加,证明ERCC2在烷化剂类抗癌药物耐药中起重要作用.

作者陈忠平 ^[1] 许志元 ^[2] Gérard MOHR ^[2] Lawrence C.Panasci ^[2] 学术成果认领

作者单位中山大学肿瘤医院神经外科,广州,510060 ^[1] Lady Davis Institute for Medical Research, McGill University, 3755 Cote Ste Catherine, Montreal, Quebec H3T IE2 Canada ^[2]

关键词核苷酸切割修复切割修复交叉互补基因2 化疗/耐药胶质瘤

医学主题词细胞(Cells)转染(Transfection)肿瘤(Neoplasms)基因(Genes)癌(Carcinoma)

分类号 R739.41（神经系肿瘤）R730.53（肿瘤学一般性问题）

栏目名称

论著与学术交流

DOI 10.3969/j.issn.1002-0152.2002.05.007

发布时间 2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

教育部留学回国人员科研启动基金（433②;2000;211;98-677）