尼古丁对培养大鼠基底前脑胆碱能神经元生长存活及TrkA表达的影响

Effects of nicotine on the growth and the TrkA expression of cultured primitive rat basal forebrain cholinergic neurons

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摘要目的探讨不同浓度的尼古丁对原代培养的大鼠基底前脑胆碱能神经元的高亲和力神经生长因子受体(TrkA)表达的影响,结合细胞形态学观察和四甲基偶氮唑盐(MTT)实验了解TrkA表达变化对细胞生长的影响.方法运用细胞原代培养的方法培养大鼠基底前脑胆碱能神经元并进行鉴定,用0.01,0.1,1,10和100 μmol/L五个终浓度的尼古丁对原代培养细胞进行干预,观察细胞的形态变化,MTT实验观察细胞的活力,提取细胞总RNA行RT-PCR观察神经元TrkA mRNA表达的变化,免疫细胞学化观察TrkA表达的变化;用10 μmol/L终浓度的尼古丁以不同的时间(分别为8,24,48 h)进行干预,观察不同时间干预下上述指标的变化.结果在0.01～10 μmol/L浓度范围内的尼古丁呈剂量依赖性地增加神经元TrkA的表达,100μmol/L浓度的尼古丁则引起TrkA表达的下降,前浓度范围的尼古丁可以剂量依赖性地增加原代培养的神经元细胞突起数量、平均突起长度和最长突起长度,增加MTT法测得的OD值,100 μmol/L终浓度尼古丁则产生相反的作用.结论在一定浓度范围内,尼古丁可以增加原代培养的胆碱能神经元TrkA表达,对神经元可能具有营养作用.