换一批视网膜神经节细胞-5应激损伤后原蛋白转化酶-2和羧基肽酶-E介导的神经肽加工
Pro-protein convertase-2/carboxypeptidase-E mediated neuropeptide processing of RGC-5 cell after in vitro ischemia
摘要目的通过分析细胞和培养液中的原蛋白转化酶-2,羧基肽酶-E和前神经肽原-Y蛋白的表达水平,研究视网膜神经节细胞-5(retina ganglion cell-5 cells,RGC-5)在应激损伤后的神经肽原蛋白加工系统的变化.方法在培养液中加入终浓度为0.1 μmol/L的staurosporine并保温24 h完成RGC-5的分化;使用氧葡萄糖剥夺(oxygen and glucosedeprivation,OGD)的细胞模型,诱导分化的RGC-5的应激损伤;利用PI和TUNEL染色方法测定急性和慢性应激模型的细胞死亡率;使用Western blot和原蛋白转化酶2的活性测定方法,检测细胞和培养液中的原蛋白转化酶-2,羧基肽酶-E和前神经肽原-Y蛋白表达水平.结果应激反应引起了以剂量依赖性的细胞死亡.随OGD应激剂量的增加,原蛋白转化酶-2和前神经肽原-Y蛋白表达水平逐渐增加,而羧基肽酶原-E逐渐降低.细胞应激损伤后,原蛋白转化酶-2的活性降低.在培养液中,原蛋白转化酶-2和原蛋白转化酶原-2逐渐降低,而羧基肽酶-E,羧基肽酶原-E和前神经肽原-Y渐渐增加.结论应激损伤通过降低原蛋白转化酶-2的活性和原蛋白转化酶原-2的激活,抑制了神经肽原蛋白加工系统,而应激后原蛋白的堆积和羧基肽酶-E细胞外排的增加又反过来加重了细胞的损伤.原蛋白加工系统在应激损伤中起重要作用.
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关键词
神经肽原蛋白加工系统视网膜神经节细胞-5体外试验氧葡萄糖剥夺模型原蛋白转化酶-2羧基肽酶-E前神经肽原-Yneuropeptide pro-protein processing systemretina ganglion cell-5in vitrooxygen and glucose deprivationpro-protein convertase-2carboxypeptidase-Epreproneuropeptide-Y
分类号
R741.02（神经病学）
栏目名称
DOI
10.1007/s12264-009-1027-8
发布时间
2009-04-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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