以曙红Y为探针的荧光猝灭法定量分析壳寡糖
Quantitative determination of chito-oligosaccharide using fluorescence quenching method with Eosin Y as a probe
摘要建立基于荧光猝灭的定量分析壳寡糖(COS)的新方法.在pH=3.80 的醋酸-醋酸钠缓冲溶液中,壳寡糖质子化氨基与曙红(EY)通过静电引力结合形成高分子复合物,破坏了EY的分子内羟基短氢键结构,导致荧光强度降低,曲拉通X-114(Tritonx-114)长链的聚氧乙烯结构和COS长链分子对EY发色团的屏蔽作用,使EY-COS-Tritonx-114 体系的荧光猝灭作用进一步增强.在一定浓度范围内,荧光的猝灭程度与COS的浓度呈线性关系.基于此,建立了一种灵敏度高、简易可行的定量分析壳寡糖新方法.结果:在优化的检测条件下,在 0.10~3.00 μg/mL范围内,ΔF与壳寡糖浓度存在良好的线性关系,回归方程为ΔF=975.69 c+68.742(c:μg/mL),R2=0.9966,检出限为 39.83 ng/mL.该法简便、快速、准确可靠,可用于较为复杂样品中壳寡糖的含量测定.
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