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水产品中副溶血弧菌、溶藻弧菌和霍乱弧菌三重PCR检测方法的建立

Development of triple PCR method for detecting Vibrio parahaemolyticus,Vibrio alginolyticus and Vibrio cholerae in aquatic foods

摘要为实现水产食品中多种弧菌同步快速检测,拟建立一种同时检测副溶血弧菌、溶藻弧菌和霍乱弧菌的三重PCR快速检测方法.根据副溶血弧菌的blaCARB-17 基因、溶藻弧菌的gyrB基因和霍乱弧菌的toxR基因设计特异性引物.针对 3 种弧菌分别建立单重PCR体系并优化各项主要反应参数,确定最佳退火温度.然后建立多重PCR体系并优化其反应参数,分析三重PCR的特异性和灵敏度;并验证其实效性.结果表明:三重PCR的最佳退火温度为 60℃,能同时扩增出副溶血弧菌blaCARB-17 基因的 230 bp片段、溶藻弧菌gyrB基因的 337 bp片段,霍乱弧菌toxR基因的 130 bp片段,灵敏度分别为 0.583 ng/μL、0.394 ng/μL、0.866 ng/μL.该三重PCR检测方法可以从实际样品中快速特异地检出三种弧菌,具有较好的特异性,较高的灵敏度,为实际生产中检测水产食品中的弧菌污染提供参考.

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作者 周茜 [1] 方林芳 [1] 李凤霞 [1] 陈清森 [1] 胡元庆 [1] 学术成果认领
作者单位 闽南师范大学生物科学与技术学院,漳州 363000 [1]
分类号 TS207.4
栏目名称 分析测试
DOI 10.19804/j.issn1006-2513.2024.4.031
发布时间 2024-05-14
基金项目
福建省自然科学基金面上项目 福建省现代农业生猪产业技术体系
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