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基于磁性纳米粒子的两种蛋白酶固定化策略对蛋白水解效率的对比研究

Comparative study on two immobilization strategies of protease based on magnetic nanoparticles and their proteolytic efficiency

摘要为了比较木瓜蛋白酶的不同固定化方法,采用溶剂热法制备得到磁性纳米粒子,并通过硅烷化学进行表面氨基化,再分别通过聚丙烯酸原位聚合和丁二酸酐修饰两种方法实现纳米表面羧基化,进而通过酰胺化实现木瓜蛋白酶的固定化.对木瓜蛋白酶的两种固定化条件进行优化,比较两种木瓜蛋白酶的酶学性质,并对两种固定化酶的蛋白水解效果进行评价.结果表明经丁二酸酐修饰法固定化酶的最适pH为11.0,经聚丙烯酸原位聚合法固定化酶的最适pH为6.0,两者最适温度均为50℃.丁二酸酐修饰后固定化酶对酪蛋白的水解度可达40%左右,另一种仅25%左右.因此,丁二酸酐修饰后的磁性纳米粒子固定化酶的方法在酶学性质方面较优,对酪蛋白的水解度更高.

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