液相色谱-串联质谱法快速测定野生菌中9种蘑菇毒素

Fast determination of 9 mushroom toxins in wild fungus by liquid chromatography-tandem mass spectrometry

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摘要目的建立液相色谱-串联质谱技术(LC-MS/MS)测定野生菌中5种急性肝衰竭型(α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽和二羟鬼笔毒肽)和4种神经-精神紊乱型(鹅膏蕈氨酸、毒蝇母、毒蝇碱和裸盖菇素)蘑菇毒素的分析方法.方法样品经干燥后采用0.5％(V/V)甲酸50％(V/V)甲醇-水溶液提取、乙腈沉淀蛋白质、水稀释后,采用XBridgeTM BEH C18柱(150 mm×3.0 mm,2.5 μm)分离、0.005％(V/V)甲酸水溶液-甲醇流动相体系梯度洗脱,MS/MS多反应监测(MRM)模式测定.结果通过优化样品提取、稀释倍数和色谱条件,实现基于纯溶剂标准校正的不同野生菌中9种蘑菇毒素的定性和定量测定.样品基质中9种蘑菇毒素的检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别为 6～15 mg/kg 和 20～50 mg/kg,线性范围为 0.004～2 mg/L,相关系数 r 在 0.997 3～0.999 5 之间.50、500和5 000 mg/kg三水平加标平均回收率为78.6％～109.7％,相对标准偏差(RSD)为2.7％～9.0％.多起中毒事件中采集的不同野生菌毒素组成和含量差异大.结论本方法操作简便、快速,结果准确,已应用于常见有毒野生菌中蘑菇毒素检测和中毒应急事件处置,可以为中毒病因的鉴定和患者的及时救治提供快速、准确的技术支持.