摘要目的:分离纯化苦瓜核糖核酸酶,并进行酶学性质及生物学性质研究,为其生物活性蛋白研究提供依据.方法:采用乙醇沉降、C1s反相高效液相色谱、Tricine-SDS-PAGE和等电聚焦等方法分离纯化与鉴定,以酵母tRNA为底物测定核糖核酸酶酶活性.结果:从苦瓜中分离纯化获得一种核糖核酸酶,命名为MC-RNase.Tricine-SDS-PAGE和C18反相液相色谱鉴定表明该酶具有较高纯度.其N-端氨基酸序列为VNEFDYYQVVLQWQPAT,相对分子质量为14 ku,等电点PI值为8.1;酶学性质表明,该酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH值为5,金属离子Zn2+、Fe2+、Fe3+、Mg2++对该酶均有抑制作用,而pb2+可以增强该酶活性;细胞试验结果表明,该酶对人正常细胞L-02及肝癌细胞Hep-G2并没有明显的抑制作用.结论:从新鲜苦瓜组织中分离并鉴定出一种新的核糖核酸酶.
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