换一批以两阶段流加策略在大肠杆菌中生产褐色嗜热裂孢菌葡萄糖异构酶
Production of Thermobifida fusca GIase in Escherichia coli by a Two-stage Nutrient Feeding Strategy
摘要为达到褐色嗜热裂孢菌葡萄糖异构酶在大肠杆菌中的过量表达,褐色嗜热裂孢菌葡萄糖异构酶的编码基因被植入含有T7强启动子的表达载体pET-24a(+)中,并转入重组大肠杆菌BL21 (DE3)进行表达,于3L发酵罐中采用两阶段补料策略进行高密度发酵产酶.在诱导前阶段,设定比生长速率μset=0.25,补料流加速率以指数方式增长;在诱导阶段,根据诱导后培养基中甘油残留量和乙酸的积累量,补料流加速率以梯度方式下降.在此流加策略下进一步考察影响发酵产酶的诱导强度、诱导节点、诱导温度和复合氮源的添加量等因素.最终根据两阶段流加策略,在乳糖流加速率0.2 g/(L·h),诱导时菌浓(DCW)30 g/L,诱导温度25℃和适量添加复合氮源的条件下,1 mL发酵液的菌体细胞内重组GIase产量达到124U,这是通过菌体发酵产GIase获得的最高产量.
更多相关知识
关键词
褐色嗜热裂孢菌葡萄糖异构酶两阶段流加策略高密度发酵诱导条件优化Thermobifida fusca glucose isomerasetwo-stage nutrient feeding strategyhigh density fermentationoptimization of induction conditions
栏目名称
DOI
10.16429/j.1009-7848.2018.02.010
发布时间
2018-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（81573536）
安徽省教育厅自然科学研究重点项目（KJ2013A264）
安徽省教育厅自然科学研究重点项目（KJ2015A454）
高等学校优秀青年人才支持计划（gxyq2017057）
安徽省高等学校自然科学研究重点项目（WXZR201616）
- 浏览0
- 被引1
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
