换一批摘要单核细胞增生李斯特菌是一种重要的食源性致病菌, 存在于多种环境中, 造成牛奶、肉类、水产品等的食品安全问题.李斯特菌噬菌体编码的裂解酶能够特异性地裂解宿主细胞, 释放胞内的子代噬菌体.本研究旨在构建李斯特菌噬菌体A500裂解酶的细胞壁结合结构域CBD500的异源表达系统, 获得重组蛋白.首先通过体外扩增得到CBD500基因, 克隆到表达载体p ET32a (+) 中, 转化表达菌株大肠杆菌BL21 (DE3) .阳性重组菌在30℃, 0.1 mmol/L IPTG中诱导4 h后, 以可溶形式表达分子质量约35 ku的重组蛋白.利用镍离子亲和层析纯化目的蛋白, 纯化产物质量浓度为0.62 mg/mL.间接ELISA试验证实, 纯化的重组蛋白具有生物学活性, 可用于进一步研究裂解酶的理化性质和作用机制.
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10.16429/j.1009-7848.2018.08.010
发布时间
2018-11-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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