基于蛹虫草单核芽生孢子的原生质体制备条件的优化

Optimization of the Preparation Conditions of Protoplasts from Mononuclear Blastospores of Cordyceps militaris

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摘要为了获得单细胞核的蛹虫草材料和制备原生质体的最适酶解条件,以蛹虫草芽生孢子为试验材料,通过荧光染色观察其细胞核数,以溶壁酶质量分数、酶解温度、酶解时间为试验因子,原生质体得率为响应值,采用单因素和Box-Behnken试验设计进行优化.荧光显微镜观察结果表明蛹虫草芽生孢子为单个细胞核.响应面优化试验结果表明蛹虫草原生质体最适制备条件为:溶壁酶质量分数2.06％,酶解温度26.1℃,酶解时间2.57 h.在此条件下,原生质体得率的预测值为8.97×106个/mL,验证试验所得原生质体得率为(9.17±0.29)×106个/mL,预测值和试验值差异不显著,回归模型拟合良好.在优化条件下制备的原生质体在含有0.8 mol/L甘露醇的再生培养基上的再生率达43.33％±2.08％.

作者娄海伟 ^[1] 余颖豪 ^[2] 林俊芳 ^[2] 郭丽琼 ^[2] 叶志伟 ^[2] 李艳 ^[3] 魏韬 ^[2] 云帆 ^[4] 学术成果认领

作者单位华南农业大学食品学院生物工程系广州 510642;河南工业大学粮油食品学院郑州 450001 ^[1] 华南农业大学食品学院生物工程系广州 510642;广东省微生态制剂工程技术研究中心广州 510642 ^[2] 华南农业大学食品学院生物工程系广州 510642 ^[3] 广州市澳键丰泽生物科技股份有限公司广州 510760 ^[4]

关键词丝状真菌溶壁酶响应面法再生培养基渗透压稳定剂

栏目名称 加工技术

DOI 10.16429/j.1009-7848.2020.06.016

发布时间 2020-07-15

基金项目

国家自然科学基金项目 广东省科技项目 广东省自然科学基金项目