换一批植物乳杆菌WU146-磷酸-β-葡萄糖苷酶的基因克隆、蛋白表达及生物信息学分析
Cloning, Protein Expression and Bioinformatics Analysis of 6-Phosphor-β-glucosidase Gene in Lactobacillus plantarum WU14
摘要植物乳杆菌是一类兼性异养,兼性厌氧的同型发酵乳酸菌,其在改善食品风味和发酵特性等方面发挥着重要作用,而这种功能特征与其具有糖苷酶活性密切相关.为了挖掘植物乳杆菌糖苷酶的应用价值,以植物乳杆菌WU14为研究对象,利用聚合酶链式反应(PCR)技术成功克隆了8个WU14的糖苷水解酶,生物信息学分析表明均为糖苷水解酶1家族(GH1)的6-磷酸-β-葡萄糖苷酶基因.鉴于植物乳杆菌中该类糖苷酶鲜有报道,采用原核异源表达展开研究.序列分析表明8个酶蛋白氨基酸序列具有GH1家族的6-磷酸-β-葡萄糖苷酶典型的2个保守催化位点,序列一致性在32％～74％之间.经SDS-PAGE,8个蛋白均在大肠杆菌中表达,其中BglAW14、BglCW14、BglFW14为部分可溶性表达,其余为蛋白表达,形成包涵体.生物信息学分析显示:8个基因的编码蛋白都无信号肽和跨膜结构,疏水性较强.由亚细胞定位预测可知,除BglEW14主要存在于分泌结构内和BglHW14主要存在于细胞膜外,其余6个基因都存于细胞质内.对8个6-磷酸-β-葡萄糖苷酶基因的克隆表达及生物学序列分析,为进一步探究植物乳杆菌来源的6-磷酸-β-葡萄糖苷酶的分子机理研究奠定了基础.
更多相关知识
栏目名称
DOI
10.16429/j.1009-7848.2022.06.007
发布时间
2022-07-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（31760438）；
国家自然科学基金（32072166）；
广东省自然科学基金面上项目（2019A1515011696）；
广东省普通高校重点领域专项(乡村振兴)项目（2020ZDZX1020）
- 浏览15
- 被引1
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
