换一批基于葡萄糖激酶和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的NADPH高效再生
Efficient Regeneration of NADPH Based on Glucose Kinase and Glucose-6-phosphate Dehydrogenase
摘要目的:构建辅酶NADPH高效再生的基因工程菌,获得辅酶NADPH高效再生的最佳工艺条件.方法:利用基因工程技术将辅酶NADPH再生关键酶的基因glk和zwf导入到大肠杆菌BL21中,实现辅酶NADPH循环高效再生,并优化辅酶NADPH再生的工艺条件.结果:成功构建了含有辅酶NADPH再生关键酶两个基因的重组大肠杆菌BL21/pETDuet-1-glk-zwf;通过正交设计优化试验,获得重组工程菌株产辅酶NADPH的最佳工艺条件是:诱导温度20℃、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷浓度0.25 mmol/L、接种量1.5％、装液量100 mL/250 mL.在此条件下进行1 L发酵摇瓶诱导培养48 h,辅酶NADPH产量高达151.79μmol/L.结论:研究结果为辅酶NADPH循环再生提供了良好的理论基础.
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DOI
10.16429/j.1009-7848.2022.08.018
发布时间
2022-09-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
浙江省自然科学基金（LY21C200006）
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